新生兒遺傳代謝病篩查血片

 

采集技術(shù)規(guī)范

血片采集是新生兒遺傳代謝病篩查技術(shù)流程中最重要的環(huán)節(jié)。血片質(zhì)量直接影響實驗室檢測結(jié)果，開展新生兒遺傳代謝病血片采集及送檢的醫(yī)療機構(gòu)應當按本技術(shù)規(guī)范要求完成血片采集工作。

一、基本要求

（一）采血機構(gòu)設置。

設有產(chǎn)科或兒科診療科目的醫(yī)療機構(gòu)均應當開展新生兒遺傳代謝病篩查血片采集。

（二）采血人員要求。

1.具有與醫(yī)學相關的中專以上學歷，從事醫(yī)學臨床工作2年以上。

2.接受過新生兒遺傳代謝病篩查相關知識和技能的培訓并取得技術(shù)合格證書。培訓內(nèi)容包括：新生兒遺傳代謝病篩查的目的、原則、方法及網(wǎng)絡運行；濾紙干血片采集、保存、遞送的相關知識；新生兒遺傳代謝病篩查相關信息和檔案管理。

二、采血機構(gòu)和人員職責

（一）積極開展新生兒遺傳代謝病篩查的宣傳教育工作。

（二）加強對本機構(gòu)血片采集人員的管理和培訓。

（三）承擔本機構(gòu)新生兒遺傳代謝病篩查有關信息的收集、統(tǒng)計、分析和上報工作。

（四）血片采集人員在實施血片采集前，應當將新生兒遺傳代謝病篩查的目的、意義、篩查疾病病種、條件、方式、靈敏度和費用等情況如實告知新生兒的監(jiān)護人，并取得書面同意。

（五）認真填寫采血卡片，做到字跡清楚、登記完整。卡片內(nèi)容包括：采血單位、母親姓名、住院號、居住地址、聯(lián)系電話、新生兒性別、孕周、出生體重、出生日期、采血日期和采血者等。

（六）嚴格按照新生兒遺傳代謝病篩查血片采集步驟采集足跟血，制成濾紙干血片，并在規(guī)定時間內(nèi)遞送至新生兒遺傳代謝病篩查實驗室檢驗。

（七）因特殊情況未按期采血或不合格標本退回需要重新采血者，應當及時預約或追蹤采集血片。

（八）對可疑陽性病例應當協(xié)助新生兒遺傳代謝病篩查中心，及時通知復查，以便確診或采取干預措施。

（九）做好資料登記和存檔保管工作，包括掌握活產(chǎn)數(shù)、篩查數(shù)、新生兒采血登記信息、反饋的檢測結(jié)果及確診病例等資料，保存時間至少10年。

三、血片采集步驟

（一）血片采集人員清洗雙手并佩戴無菌、無滑石粉的手套。

（二）按摩或熱敷新生兒足跟，并用75%乙醇消毒皮膚。

（三）待乙醇完全揮發(fā)后，使用一次性采血針刺足跟內(nèi)側(cè)或外側(cè)，深度小于3毫米，用干棉球拭去第1滴血，從第2滴血開始取樣。

（四）將濾紙片接觸血滴，切勿觸及足跟皮膚，使血液自然滲透至濾紙背面，避免重復滴血，至少采集3個血斑。

（五）手持消毒干棉球輕壓采血部位止血。

（六）將血片懸空平置，自然晾干呈深褐色。避免陽光及紫外線照射、烘烤、揮發(fā)性化學物質(zhì)等污染。

（七）及時將檢查合格的濾紙干血片置于密封袋內(nèi)，密閉保存在2～8℃冰箱中，有條件者可0℃以下保存。

（八）所有血片應當按照血源性傳染病標本對待，對特殊傳染病標本，如艾滋病等應當作標識并單獨包裝。

四、采血工作質(zhì)量控制

（一）血片采集的濾紙應當與試劑盒標準品、質(zhì)控品血片所用濾紙一致。

（二）采血針必須一人一針。

（三）正常采血時間為出生72小時后，7天之內(nèi)，并充分哺乳；對于各種原因（早產(chǎn)兒、低體重兒、正在治療疾病的新生兒、提前出院者等）未采血者，采血時間一般不超過出生后20天。

（四）合格濾紙干血片應當為：

1.至少3個血斑，且每個血斑直徑大于8毫米。

2.血滴自然滲透，濾紙正反面血斑一致。 

3.血斑無污染。

4.血斑無滲血環(huán)。

（五）濾紙干血片應當在采集后及時遞送，最遲不宜超過5個工作日。

（六）有完整的血片采集信息記錄。

新生兒遺傳代謝病篩查

實驗室檢測技術(shù)規(guī)范

本規(guī)范適用于承擔新生兒苯丙酮尿癥和先天性甲狀腺功能減低癥等新生兒遺傳代謝病篩查實驗室檢測的醫(yī)療機構(gòu)。

一、基本要求

（一）機構(gòu)設置。省、自治區(qū)、直轄市人民政府衛(wèi)生行政部門按照本區(qū)域規(guī)劃指定具有能力的醫(yī)療機構(gòu)為新生兒遺傳代謝病篩查中心,其實驗室年篩查檢測量應當達3萬人次以上。

（二）人員要求。

1.實驗室負責人：與醫(yī)學相關的本科以上學歷，高級職稱，具有兒科或臨床檢驗工作經(jīng)驗，從事新生兒遺傳代謝病篩查工作5年以上，掌握新生兒遺傳代謝病篩查網(wǎng)絡運作和管理。

2.實驗室技術(shù)人員：中專以上學歷，從事檢驗工作2年以上，具有技師以上職稱，接受過省級以上衛(wèi)生行政部門組織的新生兒遺傳代謝病篩查相關知識和技能培訓并取得技術(shù)合格證，包括：

（1）新生兒遺傳代謝病篩查的目的、原則、方法及網(wǎng)絡運行；

（2）所篩查病種的相關知識； 

（3）濾紙干血片采集、保存、處理的相關知識； 

（4）檢測技術(shù)的基本知識和技能操作； 

（5）新生兒遺傳代謝病篩查結(jié)果的定量和定性判斷； 

（6）實驗室質(zhì)量控制的基本技能；

（7）生物安全等相關知識。

3.文案人員：熟練掌握計算機操作（文字處理及統(tǒng)計）技術(shù)且有檔案管理的工作經(jīng)驗。

（三）設備要求。

種類	數(shù)目	用途
酶標儀或熒光分析儀	1臺	實驗檢測
洗板儀	1臺	實驗板的沖洗
振蕩器	1臺	實驗試劑的混勻
計算機（包括打印機）	1臺	數(shù)據(jù)處理
溫箱或水浴箱	1臺	實驗恒溫處理
2～8℃冷藏柜	2臺	試劑存放
多通道加樣器	2支	實驗加樣
單通道加樣器	2支	實驗加樣
打孔器	5把	濾紙干血片打孔
超凈工作臺	1臺	細菌抑制法實驗操作
微波爐或加熱攪拌器	1臺	細菌抑制法培養(yǎng)基制備
實驗室通用低值用品	適量	各類實驗用

注：以上設備可根據(jù)篩查量、實驗方法及篩查病種適當調(diào)整。

（四）房屋要求。

1.實驗室用房2間，使用面積至少40平方米以上。

2.綜合用房2間，至少20平方米以上，用于濾紙干血片的驗收、計算機錄入和資料登記保存。

3.血片儲藏室或冷庫1間，用于濾紙干血片的長期保存。

4.房屋面積應當根據(jù)篩查量及篩查病種適當增加。

二、實施原則與職責

（一）必須符合《新生兒疾病篩查管理辦法》及《醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室管理辦法》。

（二）收到標本應當在24小時內(nèi)登記，不符合要求的標本應當立即退回重新采集。

（三）采用國家規(guī)定的實驗方法，且具有國家批準文號的試劑和設備進行檢測。

（四）必須接受衛(wèi)生部臨床檢驗中心的質(zhì)量監(jiān)測和檢查。

（五）檢測結(jié)果及時反饋，發(fā)現(xiàn)漏檢病例，須尋找原因。

（六）必須建立以下實驗室規(guī)章制度：

1.人員分工責任制度。

2.各種技術(shù)操作程序。

3.質(zhì)量控制管理制度。

4.儀器管理及校準制度。

5.試劑材料管理制度。

6.標本登記保存制度。

7.安全制度。

8.應急預案。

（七）實驗室檢測結(jié)果和資料保存完整，內(nèi)容包括：

1.不符合要求退回的血片標本信息，應當注明原因及日期。

2.每次檢測結(jié)果的原始資料，包括標準曲線、質(zhì)控結(jié)果、篩查結(jié)果等。

3.有關質(zhì)量控制資料，包括室內(nèi)質(zhì)控圖、實驗室間質(zhì)量評價結(jié)果反饋、失控原因、糾正方法等。

若資料為電子版本，則需備份。

三、檢測方法

對于2次實驗結(jié)果均大于陽性切值的，須追蹤確診。

（一）苯丙酮尿癥。

1.以苯丙氨酸（Phe）作為篩查指標。

2.Phe濃度陽性切值根據(jù)實驗室及試劑盒而定，一般大于120μmol/L（2mg/dl）為篩查陽性。

3.篩查方法為熒光分析法、定量酶法、細菌抑制法和串聯(lián)質(zhì)譜法。

（二）先天性甲狀腺功能減低癥。

1.以促甲狀腺素（TSH）作為篩查指標。

2.TSH濃度的陽性切值根據(jù)實驗室及試劑盒而定，一般大于10～20μIU/ml為篩查陽性。

3.篩查方法為時間分辨免疫熒光分析法（Tr-FIA）、酶免疫熒光分析法（FEIA）和酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。

四、質(zhì)量控制

（一）實驗室須在接到標本5個工作日內(nèi)進行檢測，并出具可疑陽性報告。

（二）每月向開展新生兒遺傳代謝病篩查的醫(yī)療機構(gòu)反饋實驗室檢測結(jié)果。

（三）每年參加全國新生兒疾病篩查實驗室間質(zhì)量評價，成績合格。

（四）濾紙干血片標本必須保存在2～8℃條件下（有條件的實驗室可0℃以下保存）至少5年，以備復查。 

（五）有完整的實驗室檢測信息資料，存檔保留至少10年。

苯丙酮尿癥和先天性甲狀腺功能

減低癥診治技術(shù)規(guī)范

 

一、基本要求

（一）機構(gòu)設置。省、自治區(qū)、直轄市人民政府衛(wèi)生行政部門根據(jù)本行政區(qū)域規(guī)劃的實際情況，指定新生兒遺傳代謝病篩查中心或具有能力的醫(yī)療機構(gòu)承擔新生兒遺傳代謝病診治工作。

（二）人員要求。

1.承擔新生兒遺傳代謝病篩查可疑陽性或陽性患兒召回的衛(wèi)生專業(yè)人員，應當具有與醫(yī)學相關的中專以上學歷，從事醫(yī)療保健工作2年以上。

2.從事新生兒遺傳代謝病篩查診治的人員必須取得執(zhí)業(yè)醫(yī)師資格，并具有中級以上兒科臨床專業(yè)技術(shù)職稱。

3.從事新生兒遺傳代謝病篩查診治的相關人員應當通過遺傳代謝病、內(nèi)分泌等專業(yè)及新生兒遺傳代謝性疾病篩查相關知識和技能培訓，培訓主要內(nèi)容包括：新生兒遺傳代謝性疾病篩查目的、方法、陽性病例追訪及網(wǎng)絡管理技術(shù)等；新生兒遺傳代謝性疾病篩查、確診的檢測方法和臨床意義；常見遺傳代謝性疾病及內(nèi)分泌疾病的發(fā)病機理、臨床表現(xiàn)、診斷和鑒別診斷、治療、隨訪、預后評估等。

（三）機構(gòu)與人員職責。

1.新生兒遺傳代謝病篩查中心或診治機構(gòu)應當建立健全各項工作制度、診療常規(guī)和業(yè)務操作規(guī)范。嚴格按照《新生兒疾病篩查管理辦法》要求的職責、診治技術(shù)規(guī)程操作。應當建立?？茩n案與管理制度、召回制度、轉(zhuǎn)診制度、隨訪評估制度，及時做好統(tǒng)計、分析、上報和反饋確診數(shù)、治療數(shù)及治療評估結(jié)果。

2.對可疑陽性或陽性患兒應當立即進行召回，提供進一步的確診或鑒別診斷服務。當確診患兒接到告知后，應當要求患兒立即接受治療。

二、召回制度

省、自治區(qū)、直轄市人民政府衛(wèi)生行政部門負責組織本行政區(qū)域醫(yī)療機構(gòu)開展新生兒遺傳代謝病篩查工作，制定本行政區(qū)域新生兒遺傳代謝病篩查陽性者召回工作制度。

（一）新生兒疾病篩查陽性者依托婦幼保健網(wǎng)絡進行召回、追蹤隨訪。

（二）負責召回的人員接到篩查中心出具的可疑陽性報告，可采用各種方式（電話、短信或書面等）立即通知新生兒監(jiān)護人到篩查中心及時進行復查，盡早給予治療。

（三）因地址不詳或拒絕隨訪等原因而失訪者，須注明原因，做好備案工作。

（四）每次通知均須詳細記錄，相關資料至少保存10年。

三、診斷

（一）苯丙酮尿癥（PKU）和四氫生物蝶呤缺乏癥（BH4D）。

新生兒血苯丙氨酸濃度持續(xù)>120μmol/L為高苯丙氨酸血癥（HPA）。所有高苯丙氨酸血癥者均應當進行尿蝶呤譜分析、血二氫蝶啶還原酶(DHPR)活性測定，以鑒別苯丙氨酸羥化酶（PAH）缺乏癥和四氫生物蝶呤缺乏癥。四氫生物蝶呤（BH4）負荷試驗可協(xié)助診斷。

1.苯丙酮尿癥：高苯丙氨酸血癥排除BH4缺乏癥后， Phe濃度>360μmol/L為PKU，血Phe≤360μmol/L為輕度HPA。

2.四氫生物蝶呤缺乏癥：最常見為6-丙酮酰四氫蝶呤合成酶(PTPS)缺乏癥（尿新蝶呤增高，生物蝶呤及生物蝶呤與新蝶呤百分比極低），其次為DHPR缺乏癥（DHPR活性明顯降低），其他類型少見。

（二）先天性甲狀腺功能減低癥（CH）。

1.確診指標:血清促甲狀腺素（TSH），游離甲狀腺素（FT4）濃度。

2.血TSH增高，FT4降低者，診斷為先天性甲狀腺功能減低癥。 

3.血TSH增高，FT4正常者，診斷為高TSH血癥。

4.甲狀腺超聲檢查、骨齡測定以及甲狀腺同位素掃描（ECT）等可作為輔助手段。 

四、治療

治療原則：一旦確診，立即治療，以避免或減輕腦損傷。

（一）苯丙氨酸羥化酶缺乏癥。

在正常蛋白質(zhì)攝入情況下，血苯丙氨酸濃度持續(xù)>360μmol/L兩次以上者均應當給予低苯丙氨酸飲食治療，血苯丙氨酸濃度≤360μmol/L者需定期隨訪觀察。

1.血苯丙氨酸濃度監(jiān)測：低苯丙氨酸飲食治療者，如血苯丙氨酸（Phe）濃度異常，每周監(jiān)測1次；如血Phe濃度在理想控制范圍內(nèi)可每月監(jiān)測1~2次，使血苯丙氨酸濃度維持在各年齡組理想控制范圍。定期進行體格發(fā)育評估，在1歲、3歲、6歲時進行智能發(fā)育評估。

2.治療至少持續(xù)到青春發(fā)育成熟期，提倡終生治療。

3.對成年女性PKU患者，應當告知懷孕之前半年起嚴格控制血苯丙氨酸濃度在120~360μmol/L，直至分娩。

4.四氫生物蝶呤缺乏癥：給予四氫生物蝶呤、神經(jīng)遞質(zhì)前質(zhì)（多巴、5－羥色氨酸）等聯(lián)合治療。

（二）先天性甲狀腺功能減低癥。

1.甲狀腺激素替代治療：先天性甲狀腺功能減低癥患兒給予左旋甲狀腺素（L-T4) 治療，每天劑量1次口服。L-T4初始治療劑量6-15 mg/kg/d，使 FT4在2周內(nèi)達到正常范圍。在之后的隨訪中，L-T4維持劑量必須個體化，根據(jù)血FT4、TSH濃度調(diào)整。血FT4應當維持在平均值至正常上限范圍之內(nèi)。高TSH血癥酌情給予L-T4治療，初始治療劑量可根據(jù)TSH升高程度調(diào)整。

2.患者需定期復查FT4、TSH濃度，以調(diào)整L-T4治療劑量。首次治療后2周復查。如有異常，調(diào)整L-T4劑量后1個月復查。在甲狀腺功能正常情況下，1歲內(nèi)2~3月復查1次，1歲至3歲3~4月復查1次，3歲以上6月復查1次。

3.定期進行體格發(fā)育評估，在1歲、3歲、6歲時進行智能發(fā)育評估。

4.甲狀腺發(fā)育不良、異位者需要終生治療，其他患兒可在正規(guī)治療2~3年后減藥或者停藥1個月，復查甲狀腺功能、甲狀腺B超或者甲狀腺同位素掃描（ECT）。如TSH增高或伴有FT4降低者，應當給予L-T4終生治療；如甲狀腺功能正常者為暫時性甲狀腺功能減低癥，停藥并定期隨訪。